NFK GreenScreen™ Assays

NFK GreenScreen™檢測

色氨酸代謝在免疫調節和神經退行性疾病中起重要作用。色氨酸代謝酶是癌癥免疫療法和神經退行性疾病的重要藥物靶標。為了高通量篩選色氨酸代謝酶，我們開發了NFK GreenScreen™檢測方法來篩選吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）和色氨酸雙加氧酶（TDO）。

NFK Green™測定法可在溫和條件下工作，適用于高通量篩選。NFK GreenScreen™試劑盒包含所有進行測定的成分，包括參考抑制劑。下面顯示了用NFK GreenScreen™測量的IDO1和TDO參考抑制劑的劑量反應曲線。

該套件有五種格式：
1. hIDO GreenScreen™；包括純化的人吲哚胺2，3-二加氧酶（IDO1）
2。包括純化的人色氨酸雙加氧酶（TDO）
3。
mTDO GreenScreen™; 包括純化的小鼠吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）4。包括純化的小鼠色氨酸雙加氧酶（TDO）
5。NFKGreen™用于基于細胞的篩選；用于基于細胞的測定 不含酶

與當前用于IDO和TDO測試的檢測標準相比，NFK GreenScreen™檢測條件溫和（環境溫度和中性pH），避免了加熱和添加酸性，堿性或劇毒試劑的情況。熒光測定法基于NTRC開發的名為NFK Green™的高度特異性和*標記。該協議可以快速實施測定以進行高通量篩選或常規化合物測試。

通過分別篩選IDO1和TDO的384孔或1536孔格式的約90.000種化合物，證明了其高通量篩選的適用性。篩選所有化合物的濃度為10 µM。

根據您的需求，我們可以提供1,000或10,000個數據點的套件。對于高通量的屏幕（> 100.000數據點），我們可以為您提供針對屏幕定制的蛋白質，試劑和緩沖液。

我們已經證明，該試劑可用于IDO1和TDO的生化測定中檢測NFK。此外，該測定法可用于測量細胞代謝色氨酸的能力，從而確定IDO1和TDO抑制劑的細胞效力。

IDO1和TDO的生化測定已開發為“僅加法”。首先，將化合物和酶結合。接下來，通過添加L-色氨酸開始反應。10或30分鐘后，通過添加NFK Green終止反應，并通過在37°C下孵育4小時進行反應。

NFK Green™與NFK反應形成綠色熒光分子，激發波長為400 nm，發射波長為510 nm，其中庫化合物的熒光干擾小。該測定法可以在所有常用的熒光或多模式閱讀器上讀取，并且適用于生化以及基于細胞的測定法來測量色氨酸代謝酶。

有關更多信息和報價請求，請發送電子郵件至services@ntrc.nl。